ELISA試劑盒臨床測定技術的發展主要在于方法學的發展，而方法學的發展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。分子生物學正在并zui終肯定會讓對整個生命科學有一個全面而*的認識，其對免疫測定技術發展的影響也是直接而又有效的，對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
在建立ELISA方法作反應動力學研究時，ELISA試劑盒實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1～2小時，產物的天生可達。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，ELISA試劑盒一般均采用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應嚴格限制在劃定的范圍內，尺度室溫溫度是指20～25℃，但詳細操縱時可根據仿單的要求控制溫育。